Презентация на тему Биохимические механизмы регуляции численности. (Лекция 3)

их согласованное поведение

СИГНАЛЫ регуляции плотности популяции. Иногда их может быть несколько

разных, иногда это единственное соединение.

“наполненности” особями (термин предложен в 1994г) - восприятие бактериями

изменений среды, которые наступают при достижении бактериальной культурой некоторой пороговой численности, и реакция на эти изменения. Цель «кворум-сенсинга» - стимулирование определённого группового поведения только в том случае, когда достигается необходимая плотность особей в популяции. В зависимости от плотности, бактерии экспрессируют разные фенотипы.
Википедия: “способность некоторых бактерий (возможно, и других микроорганизмов) общаться и координировать своё поведение за счёт секреции молекулярных сигналов”.
Кворум сенсинг (QS) в современном понимании все чаще охватывает как бактерий, так и другие организмы. Термин применяется даже для культур клеток.

Vibrio fischeri (Aliivibrio fischeri) – морская фотосинтезирующая бактерия.
Только достаточное

количество бактерий (около 1011 клеток/мл) могут создать светящуюся приманку – светящийся орган кальмара. В меньшем количестве светиться – бессмысленный расход АТФ и жирных кислот.

Пример 2: многие бактерии-фитопатогены (Erwinia carotovora, E. chrysanthemii и др.) Сигнал QS означает: “нас достаточно много, выделяй ферменты, атакующие растение”! Пока мало, следует “прятаться”, чтобы растение не обнаружило и не подготовилось.

Пример 3: патоген человека Pseudomonas aeruginosa (синегнойная палочка).
Синтезирует необходимые для вирулентности факторы – токсин А, экзоферменты (эластазы LasA и LasB, щелочную протеазу), гемолизины и поверхностно-активный рамнолипид. Формирование биопленок (см. рис. справа) обеспечивает дополнительную защиту против хозяина.

Гавайский кальмар бобтейл

колонизирующая световые органы некоторых костных рыб и моллюсков.
Её

молекула QS –
N-3-(оксогексаноил)-L-гомосеринлактон - один из видов ацилгомосеринлактонов (AHL)

Серин

Гомосерин

Образование цикла
лактона гомосерина

цепи


AHL в большинстве случаев несут в боковой цепи четное

(от 4 до 14) количество атомов С.
Базовая часть AHL относительно гидрофильна, боковая цепь – гидрофобна. С ростом длины цепи гидрофобность растет (проблема транспорта через мембрану).

Quorum sensing in gram-negative bacteria / G. Boşgelmez-Tinaz //

Turk. J. Biol. 2003. V. 27. P. 85 – 93). ГЛ = гомосеринлактон

luxI кодирует фермент LuxI - синтазу AHL
luxA и

luxB кодируют субъединицы люциферазы (фермента, обеспечивающего свечение).
lux C,D, E кодируют ферментативный комплекс редуктазы жирных кислот (ЖК - один из окисляемых субстратов в ходе люциферазной реакции, приводящей к испусканию кванта света)
lux G кодирует редуктазу ФМН (другого субстрата, окисляемого в люциферазной реакции).

– luxR кодирует белок LuxR (250 акт), транскрипционный фактор, влияющий на связывание РНК-полимеразы с ДНК.

Оперон гена lux I

Оперон гена luxR

AHL белок LuxR активирует транскрипцию оперона lux I. Без

AHL LuxR репрессирует свой синтез. Чем больше бактерий, тем больше AHL в среде и чаще его связывание с LuxR.

аналоги AHL, образуемые красной водорослью р. Delysea, представляют собой

эффективные антимикробные агенты

– как в кольце, так и в боковой цепи.
Стимулирующий

компетентность пептид (CSP) из Streptococcus pneumoniae

Пептиды-автоиндукторы (АИП) по химизму - это модифицированные олигопептиды, обычно состоящие из небольшого числа аминокислот в цепи, в кольце или в цепи + в кольце (Lazazzera, Grossman,1998).

клетки
Решение: специальные системы транспорта + трансдукция сигнала в клетку

без попадания в нее АИП из внешней среды.
Пример: Staphylococcus aureus
Экспорт пептида из клетки – с помощью белка AgrB.
1) с гена AgrD синтезируется AgrD – “заготовка” для АИП (46 ак-т, у других видов 40-65 ак-т).
2) AgrD поступает к AgrB, с помощью которого выходит во внешнюю среду.
В процессе экспорта AgrD “дозревает”: остается лишь 8 ак-т, у других 5-34 ак-ты.
События процессинга AgrD – удаление фрагментов на N- и С-конце, ковалентная связь между С-концом и цистеином.
Трансдукция сигнала: рецептор с ферментативной активностью гистидиновая протеинкиназа AgrC в мембране клетки активирует фосфорилированием внутриклеточный белок.



На основании различий в АИП и его рецепторе штаммы S.aureus делят на группы. Олигопептиды, синтезируемые одной из групп, индуцируют патогенность в этой группе и специфически подавляют системы Agr-вирулентности в других группах.

– рецептор пептида QS (AIP), сенсорная киназа, фосфорилирующая AgrA.

AgrA – в фосфорилированной форме активирует промоторы P2 (продукт – РНКII) и P3 (продукт – РНКIII). Появление РНКII приводит к синтезу АИП, а РНКIII - регулирует синтез веществ, нужных для нападения на хозяина.

Зона РНКII кодирует: 1) сигнальный модуль QS (AgrC, AgrA)
2) белки для секреции пептида QS (AgrB, AgrD)
Зона РНКIII кодирует продукты для синтеза экзобелков и проявления вирулентности.

и фарнезоловая кислота
Тирозол

Хиезон
Цис-метил-3,4-диметокси-
циннамовая кислота
Цис-метилферуловая кислота
Коллетофрагароны А и B (имеют R1 или

R2 соответственно)

Октен-3-ол

Нонаноевая кислота

гидроксилированных производных линолевой к-ты (α) из Aspergillus spp.

psi-

от: precocious sexual inducers

- стимулятор образования спор бесполого размножения

- стимуляторы полового процесса

QS дрожжей, основанной на разных ароматических спиртах. Ароматические аминотрансферазы

(Aro8, Aro9 и Aro10) синтезируют триптофол (TrpOH) из триптофана, пируватдекарбоксилазы (Pdc1, Pdc5, Pdc6) – тирозол (TyrOH) из тирозина, алкогольдегидрогеназы (Adh) - фенилэтанол (PheOH) из фенилаланина. Транскрипционный фактор Aro80 регулирует синтез аминотрансфераз Aro9 и Aro10, а активность этого фактора регулирует сам триптофан.
TrpOH и PheOH изменяют уровень экспрессии примерно 200 других целевых генов, но пути, каким способом они это делают, изучены мало.

эргостерола (дополнит мат-л)
Фунгицидные вещества,
ингибирующие синтез эргостерола, действуют после

стадии образования фарнезола, тем самым приводя к усилению его накопления.

yeast //J. Biosci. 38(4), November 2013, 1–12, Indian Academy

of Sciences - http://www.ias.ac.in/jbiosci
P. ALBUQUERQUE, A. CASADEVALL Quorum sensing in fungi – a review // Medical Mycology. 2012, 50, P. 337–345

регуляции.


Коопероны – самосохраняющиеся кооперативные (имеющие целостность)
системы

– устойчивые структурно-функциональные комплексы, выступающие
как единое целое в некотором диапазоне внешних условий

Прямая простая регуляция: Мучной хрущак – этилквинон (этилхинон) (ингибирование роста и развития личинок, каннибализм).

особей
Пример: мышевидные грызуны (по: Шилова С.А, Шилов И.А., 1997)

ПРОКАРИОТ – в интернете
Хохлов, А. С. НИЗКОМОЛЕКУЛЯРНЫЕ МИКРОБНЫЕ АУТОРЕГУЛЯТОРЫ.

Москва : Наука, 1988. 269 с.
Weber W, Fussenegger M. Design of synthetic mammalian quorum-sensing systems //Methods Mol Biol., 2011; V. 692. P. 235-249.
Про сельдь - Nicholas C. Makris, Purnima Ratilal, Srinivasan Jagannathan, Zheng Gong, Mark Andrews, Ioannis Bertsatos, Olav Rune Godø, Redwood W. Nero, J. Michael Jech. Critical Population Density Triggers Rapid Formation of Vast Oceanic Fish Shoals // Science. 2009. V. 323. P. 1734–1737.
Tao Long, Kimberly C. Tu, Yufang Wang, Pankaj Mehta, N. P. Ong, Bonnie L. Bassler, Ned S. Wingreen. Quantifying the Integration of Quorum-Sensing Signals with Single-Cell Resolution // PLoS Biology. 2009. V. 7(3). P. e1000068.